《食品微生物检测的质控要点：实验室操作标准化手册》

《食品微生物检测的质控要点：实验室操作标准化手册》

一、采样规范是质控基础

1. 采样工具需无菌处理

采样夹、采样袋等工具使用前必须高压灭菌（121℃ 20分钟）

1. 采样量必须达标

液体样品按GB 4789.4规定取100ml，固体样品按四分法取样不少于25g

1. 采样时间有要求

生鲜食品采样需在48小时内完成，冷冻食品需在解冻后2小时内检测

1. 采样记录完整

记录采样地点、时间、环境温湿度、操作人员等信息

1. 采样环境控制

采样现场需保持洁净度≥10000级，避免交叉污染

二、检测方法标准化

1. 检测流程分五步

样品预处理→菌落计数→形态观察→生化试验→结果判定

1. 培养基制备规范

按GB 4789.2要求配比，灭菌后冷却至45℃分装

1. 孵育条件严格设定

需氧菌培养35℃±1℃ 48小时，厌氧菌需专用培养箱

1. 计数方法标准化

采用膜过滤法时，膜≤45cm²，计数范围50500CFU/膜

1. 阳性对照设置

每批次检测需包含2个已知浓度的标准阳性对照

1. 质控样片验证

每月使用ATP生物荧光片验证计数准确性

三、质控体系运行要点

1. 内部质控（IQC）

每日进行空白样、质控样检测，偏差超过±15%需复测

1. 外部质控（EQA）

参加CNAS/ILAC能力验证计划，结果不得低于PT值±10%

1. 设备性能验证

培养箱温度验证每季度一次，精度±1.5℃

1. 停留时间控制

样品检测不超过7个工作日，特殊菌种检测不超过15天

1. 结果复核机制

当菌落总数＞1000CFU/g时，需双人复核确认

1. 不确定度评估

根据ISO/IEC 17025要求计算检测不确定度

1. 缺失数据处理

检测数据缺失时，需重新采样补测

1. 质量审核周期

每半年进行全面质量体系审核，记录保存期不少于2年

四、人员操作规范

1. 岗前培训要求

新员工需通过微生物学基础考试（≥80分）

1. 个人防护标准

操作时必须穿戴无菌手套、防护服、护目镜

1. 操作权限分级

仅授权人员可进行菌种保藏、结果审核

1. 培训记录管理

培训档案保存至员工离职后3年

1. 操作行为监督

通过监控系统记录关键操作步骤

1. 知识更新机制

每年参加不少于40学时的继续教育

1. 错误操作处理

发现操作失误立即终止检测并上报

1. 职业暴露处置

接触病原微生物后需进行医学观察

五、设备与环境管理

1. 设备校准周期

生物安全柜每季度校准，天平每月校准

1. 空气监测标准

操作间空气菌落数≤5CFU/m³

1. 水系统监测

纯水系统每月检测菌落总数≤1CFU/100ml

1. 设备维护记录

维护记录保存至设备报废

1. 设备报废标准

培养箱连续3次温度偏差＞2℃则报废

1. 环境清洁制度

每日使用75%乙醇擦拭操作台面

1. 消毒剂选择

使用含氯消毒剂时浓度需控制在500mg/L

1. 设备验证文件

新设备需提供ISO 13485认证文件

六、数据管理规范

1. 记录格式统一

采用GB/T 15481规定的模板

1. 数据保存期限

原始记录保存15年，电子记录备份3份

1. 数据完整性

检测报告需包含样品编号、检测项目、方法、结果、日期等信息

1. 数据追溯能力

每份报告可追溯至原始检测数据

1. 数据修约规则

终结果按有效数字修约至两位小数

1. 数据备份机制

每日22:00自动备份至异地服务器

1. 数据安全防护

电子数据加密存储，访问需双因素认证

1. 报告审核流程

审核制度（操作员→主管→技术负责人）

七、应急处理程序

1. 设备故障处理

培养箱故障时立即转移样品至备用设备

1. 环境污染处置

发现污染立即疏散人员，使用10%次氯酸钠消毒

1. 病原菌泄漏处理

按生物安全二级实验室标准处置

1. 人员感染处置

启动应急预案并上报疾控中心

1. 设备维修管理

维修期间禁止检测工作

1. 紧急备用方案

备用培养箱容量需满足30%日常需求

1. 应急演练要求

每半年进行桌面推演和实战演练

1. 应急物资储备

配备应急照明、备用电源、防护装备